食品安全快速检测技术_测定原理

　　化学比色

　　主要分为：试纸色谱比色测定、试纸比色测定、试管比色测定、滴定比色测定四种方法。

　　(1)试纸色谱比色测定 根据固定相基质的形式可以分为纸色谱、薄层色谱和柱色谱。色谱是指以滤纸作为固定相的色谱，其原理是利用被分离物质的物理、化学及生物学特性不同，使它们在某种固定相中移动速度不同而进行分离和分析的方法。例如，试纸色谱比色测定用于快速测定苏丹红、瘦肉精等有害物。

　　(2)试纸比色测定 根据待测成分与经过特殊制备的试纸作用所显的颜色与标准比色卡对照，对待测成分定性或半定量。例如，用试纸显色定性作为限量指示测定农药等;用试纸显色的深浅来半定量测定食用油的酸价、过氧化值等。

　　(3)试管比色测定 根据待测成分与标准试管所显的颜色比较，对待测成分定性或半定量.例如，用试管显色作为限量指示测定鼠药、未熟豆浆等;用试管显色的深浅半定量测定亚硝酸盐、甲醇、二氧化硫等。试管比色测定可以是目视，也可以用便携式光度计。

　　便携式仪器对某些成分进行定性或定量研究比较多，而且市场应用也比较广泛，如便携式甲醇速测仪、农药残留速测仪、食品添加剂速测仪、酸度计、电导仪等。

　　(4)滴定比色测定 用刻度或小口滴瓶分别滴定标准溶渡和待测溶液，通过计算对待测成分进行定量。例如，酸碱、络合、氧化还原性物质等。

　　分子生物

　　聚合酶链式反应(PCR)是分子生物学领域中迅速发展和广泛应用的一种技术。PCR技术主要用于检测细菌，其基本原理是应用细菌遗传物质中各菌属菌种高度保守的核酸序列，设计出相关引物，对提取到的细菌核酸片段进行扩增，用凝胶电泳和紫外核酸检测仪观察扩增结果。从样品前处理到PCR扩增及得出实验结果24h内完成。免疫捕获PCR法、荧光定量PCR法、细菌直接计数法、ATP生物发光法、微型自动荧光酶标法以及基因芯片技术等分子生物学分析检测技术应用到食品安全快速检测中。

　　免疫技术

　　免疫学分析检测技术通过抗原和抗体的特异性结合反应，再配合免疫放大技术来鉴别细菌。免疫学分析检测技术的优点是样品在进行选择性增菌后，不需分离，即可采用免疫技术进行筛选。由于抗原抗体反应的特异性，所以该方法的种类特别多，用于食品安全检测的技术主要有免疫磁珠分离法、免疫力检测试剂条、免疫乳胶试剂、免疫酶技术、免疫深沉法或免疫色谱法等。由于免疫法有较高灵敏度，增菌后，在较短的时间内达到检出度，抗原和抗体的结合厦应可在很短的时间内完成。

　　纳米技术

　　普通的ELISA技术采用的酶标板是一个固相载体，具有固/液相反应接触面积小、联接的抗体易脱落、反应速度慢且不彻底等缺点。研究成功的磁分离-ELISA技术(MS-ELISA)是一种以磁性纳米材料代替传统ELISA中的酶标板，将ELISA的显色系统与磁分离技术相结合而形成的一种新型检测方法。这门技术主要利用纳米材料的高比表面积、易于形成胶体溶液等特性，使抗原一抗体分子接触面积变大，反应较为彻底，此外磁分离使缓冲液的交换操作更为简便快速，灵敏度也得到了提高。该技术已广泛应用于食品的快速检测中。